簡介
需要的其他材料
樣品保存
樣品收集后若在 1 周內進行檢測的可保存于4℃,若不能及時檢測,請按一次使用量分裝,凍存于-20℃(1個月內檢測),或-80℃(6個月內檢測),避免反復凍融,標本溶血會影響最后檢測結果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。
如果洗滌液/稀釋液(20×)有晶體析出,需在37℃下加熱?晶體全部溶解。用蒸餾水1:20稀釋(例如:1mL 濃縮洗滌液加入19mL的蒸餾水)
試劑盒中取出標準品,準備7個試管,先從800ng/mL標準品(200μL)按需吸取一定量用1×稀釋液稀釋至40ng/mL(例:50μL的標準品母液+950μL的1×稀釋液,制備得到1000μL的40ng/mL濃度標準品),隨后在6個試管中分別加入500μL的1×稀釋液,在這6個單獨的試管中將40ng/mL標準品依次2倍倍比稀釋至6個梯度,共配制7個濃度的標準品,依次為: 40ng/mL、 20ng/mL、 10ng/mL、 5ng/mL、 2.5ng/mL、 1.25ng/mL、 0.625ng/mL,從最高濃度標準品溶液中吸取500μL標準品到下一個試管中,輕輕吹打混勻,以此類推進行標準品的倍比稀釋(如圖所示),1×稀釋液用作零濃度標準品(0ng/mL)。

使用前10分鐘,將100×生物素化抗體于1000×g離心1分鐘,隨后用1×稀釋液將100×生物素化抗體稀釋成1×生物素化抗體工作液,根據所需用量當日配置當日使用。
使用前10分鐘,將100×SA-HRP溶液于1000×g離心1分鐘,隨后用1×稀釋液將100×SA-HRP稀釋成1×SA-HRP工作液,根據所需用量配置。
結果的計算
以下數據和曲線僅供參考,實驗者需根據自己的實驗數據建立標準曲線。
標準品濃度(ng/mL)
40
20
10
5
2.5
1.25
0.625
0
OD值
2.433
1.717
1.032
0.613
0.491
0.257
0.123
0.059
校正OD值
2.374
1.658
0.973
0.554
0.432
0.198
0.064
0
下圖所示標準曲線僅供示例,結果計算應以同次試驗標準品所繪標準曲線為準計算樣本結果
重復性
板內變異系數小于10%,板間變異系數小于10%。
靈敏度
經樣本測試,本試劑盒的檢測靈敏度為0.31ng/mL。
特異性
該試劑盒測定可識別重組犬APOA1。
其他相關蛋白在稀釋緩沖液中制備為50ng/mL,并測定交叉反應性。沒有觀察到明顯的交叉反應。
使用ELISA試劑盒之前,請您必須完整閱讀說明書,本產品僅供科研使用,不能于臨床診斷或治療。